目的 探讨溶瘤新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)激活的自然杀伤(natural killer,NK)细胞通过分泌颗粒酶A(granzyme A,GZMA)诱导结直肠癌细胞焦亡的作用机制,尤其是焦亡相关蛋白焦孔素B(gasdermin B,GSDMB)表达水平在其中的作用。 各组分别与GSDMB高表达的SW837和低表达的SW480结直肠癌细胞共孵育后,通过定量PCR和ELISA分别检测NK细胞中效应分子的基因表达及蛋白质分泌水平,通过细胞增殖-毒性和乳酸脱氢酶释放检测评价2种肿瘤细胞株的存活率及焦亡情况,通过细胞形态学观察和GSDMB切割的蛋白质印迹检测验证NK细胞介导的焦亡效应。 结果 定量qPCR和ELISA结果显示,NDV感染上调了NK细胞中GZMA、IFN-γ和穿孔素的基因表达及蛋白质分泌,NDV3刺激组的GZMA( t =6.70, P =0.003)和IFN-γ( t =13.66, P <0.001)分泌水平最高,且与无刺激对照的差异均有统计学意义。
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