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siRNA转染篇-3丨阴性对照相差大?同种siRNA在不同细胞中效果不同?

05/27
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siRNA转染



今天小恒来帮大家解决一下为什么不同基因组别的阴性对照检测结果相差大;以及为什么同样的siRNA在不同细胞中效果不同。



1


阴性对照相差大?


一般情况下,各组阴性对照的检测结果应该是相近的。如果出现偏差过大的情况,则需考虑实验过程的正确性和检测结果的准确性。

包括脱靶效应、试剂浓度、引物特异性等。另外不同细胞对外界刺激反应差异也不同,同样是转染阴性对照,有的细胞对转染试剂反应较大,可能会引起靶基因的差异表达。



2


同种siRNA在不同细胞中效果不同?


由于不同细胞,在信号通路传导、基因表达水平、生理特性上都存在区别,这就导致siRNA的转染效率不同、对RNA的降解能力也不同,在干扰靶基因后,对细胞功能和状态的影响也存在差异。最终表现出siRNA的作用效果不同。

在进行实验时,可以选择在目的细胞中对靶基因具有不错的敲低效率的siRNA即可。





RNA


RNA

CRISPR/Cas9



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