迄今为止已鉴定出三种主要类型的脂肪细胞，包括白色脂肪细胞、棕色脂肪细胞和米色脂肪细胞。一般来说，白色脂肪组织（WAT）是能量储存的主要场所，由皮下脂肪储存库组成，如腹股沟白色脂肪组织（inguinal WAT, iWAT），以及内脏脂肪储存库，如附睾白色脂肪组织（eWAT）；而棕色脂肪组织（BAT）参与能量利用和体温维持，且主要位于小鼠的肩胛间区域(suprascapular)。[1]

肥胖症由能量摄入过多导致脂肪组织质量异常积聚而引起，对人类健康构成巨大威胁。

在体重正常的状态下（左），可在胸主动脉（血管周围脂肪组织[PVAT]）周围发现产热的棕色和米色脂肪细胞。这些细胞具有多房外观，由于线粒体密度高，呈棕色。腹主动脉和肠系膜脉管系统被白色脂肪细胞包围。这些单房脂肪细胞也存在于内脏和皮下脂肪库中。脂联素和血管紧张素1-7由脂肪细胞分泌，对血管系统具有舒张作用。在瘦状态下，脂肪组织体内充满了对体内平衡至关重要的不同免疫细胞，这些细胞在肥胖期间会发生巨大变化。[3] 

AAV病毒已被广泛用于动物体内脂肪组织研究，对于研究病理和推动肥胖症及其并发症治疗提供有力支撑。本文将详细介绍脂肪组织研究中AAV的使用指南，包括血清型、启动子以及注射方法推荐等。

已有的研究表明AAV8、AAV9对小鼠脂肪组织具有较强的感染能力，其中AAV9应用最为广泛。

脂肪组织研究中，可以使用广谱型的常规启动子（如CMV,CAG,U6等），以获取更好的敲低和过表达效果。也可以选择相应的组织特异性启动子以获得最佳表达效果，例如，人脂联素启动子ADP（adiponectin）可以靶向成熟脂肪细胞。

脂肪酸结合蛋白-4（FABP4），又称脂肪细胞蛋白2（aP2），是一种在巨噬细胞和脂肪细胞中高表达的脂质结合伴侣蛋白。因此FABP4(aP2)启动子经过序列优化，可以运用到AAV系统中，靶向脂肪细胞。

甲状腺激素（T3）通过诱导线粒体解偶联蛋白（UCP1）引起代谢效率低下来刺激产热，因此优化后的UCP1启动子可以应用于棕色脂肪组织研究。

下表1为AAV靶向脂肪组织特异性启动子：

AAV感染脂肪组织的最主要方式是脂肪内注射，常采用定点多点注射，其优势在于提升靶向性、所需病毒量也较少，通常小鼠注射剂量在1~5*10^11 VG/只；也有文献报道使用静脉注射，但会导致非靶向转导到肝脏或心脏组织中，需使用特异性启动子如ADP（adiponectin）来增加脂肪组织靶向性。静脉注射操作简单，无需复杂的手术操作，对实验动物的侵入性小，但对局部脂肪组织侵染效率较低，且小鼠注射剂量一般较大，根据文献推荐为2~4*10^12 VG/只。此外，对于难感染的内脏脂肪或大范围脂肪感染亦可采用腹腔注射AAV来实现。

注射方案汇总参考下表2：

本文介绍了几种常见的脂肪组织感染AAV的选择方案和注射方法。脂肪研究中，根据文献和以往经验，血清型AAV8、AAV9应用普遍，常用AAV9。启动子选择常规启动子CMV、CAG、U6以外，也可以根据需求选择组织特异性启动子如ADP、aP2、UCP1等。尾静脉注射感染脂肪组织效率低，注射剂量大，通常不做推荐；而脂肪内注射的感染效率最高，但对手术技术有更高要求。

联系我们

苏州吉玛基因股份有限公司

地址：苏州工业园区东平街199号

邮箱：szorder@genepharma.com

电话：0512-86668828

上海吉玛制药技术有限公司

地址：上海浦东新区张江路368号2号楼

邮箱：order@genepharma.com

电话：021-51320195